VIASURE Gastrointestinal Panel I Real Time PCR Detection Kit está diseñado para la identificación y diferenciación específica de Salmonella, Campylobacter y/o Yersinia enterocolitica; Shigella/EIEC; Cryptosporidium, Giardia lamblia y/o Entamoeba histolyica; Norovirus GI y/o Norovirus GII (NoV); Rotavirus (RV); Adenovirus (AdV); Astrovirus (AstV); y/o Sapovirus (SaV) en muestras de heces humanas procedentes de pacientes con signos y síntomas de infección gastrointestinal.

El uso previsto del test es facilitar el diagnóstico de infección producida por Salmonella, Campylobacter y/o Y. enterocolitica; Shigella/EIEC; Cryptosporidium, G. lamblia y/o E. histolyica; NoV GI y/o NoV GII; RV; AdV; AstV; y/o SaV en combinación con factores de riesgos clínicos y epidemiológicos.

El RNA/DNA es extraído a partir de muestras clínicas, amplificado posteriormente mediante PCR a tiempo real y detectado utilizando oligonucleótidos específicos y una sonda marcada con una molécula fluorescente y otra apantalladora (quencher) para detectar Salmonella, Campylobacter y Y. enterocolitica; Shigella/EIEC; Cryptosporidium, G. lamblia y E. histolyica; NoV GI y NoV GII; RV; AdV; AstV; y SaV.

VIASURE Gastrointestinal Panel I Real Time PCR Detection Kit está diseñado para el diagnóstico de Salmonella, Campylobacter y/o Y. enterocolitica; Shigella/EIEC; Cryptosporidium, G. lamblia y/o E. histolyica; NoV GI y/o NoV GII; RV; AdV; AstV; y/o SaV en muestras de heces humanas. Tras el aislamiento del DNA, la identificación de AdV, Salmonella, Campylobacter y/o Y. enterocolitica; Shigella/EIEC; Cryptosporidium, G. lamblia y/o E. histolyica se realiza mediante la amplificación de una región conservada de los genes específicos utilizando oligonucleótidos específicos y sondas marcadas con fluorescencia. Tras el aislamiento de RNA, la detección de virus de RNA ((NoV GI y NoV GII, RV, AtV; y SaV) se realiza mediante una RT en tiempo real en el que la transcripción inversa y la posterior amplificación de la secuencia diana específica se producen en el mismo pocillo. Tras el aislamiento del RNA, se sintetiza el DNA complementario a la secuencia diana gracias a la retrotranscriptasa o transcriptasa inversa. Posteriormente la identificación se lleva a cabo mediante la reacción en cadena de la polimerasa utilizando oligonucleótidos específicos y una sonda marcada con fluorescencia que hibridan con una región diana conservada de los genes específicos.

VIASURE Gastrointestinal Panel I Real Time PCR Detection Kit aprovecha la actividad 5´ exonucleasa de la DNA-polimerasa. Durante la amplificación del DNA, esta enzima hidroliza la sonda unida a la secuencia de DNA complementaria, separando el fluoróforo del quencher. Esta reacción genera un aumento en la señal fluorescente proporcional a la cantidad de DNA diana. Esta fluorescencia se puede monitorizar en equipos de PCR a tiempo real.

VIASURE Gastrointestinal Panel I Real Time PCR Detection Kit contiene en cada pocillo todos los componentes necesarios para llevar a cabo la PCR a tiempo real (cebadores/sondas específicos, dNTPS, tampón, polimerasa, retrotranscriptasa) en formato estabilizado, así como, un control interno para descartar la inhibición de la actividad polimerasa. Cada diana de DNA/RNA se amplifica y detecta en canales específicos (FAM, HEX, ROX y Cy5) y el control interno (CI) en el canal HEX, VIC o JOE (si está presente) (seleccionar el canal de detección según el equipo utilizado, ver instrucciones).